按國(guo)家實驗室認可(ke)的概(gai)念，是指一個能夠承擔(dan)法律(lv)責(ze)任的實體。這里所指的是實驗室（微(wei)檢室）內建立的質量管理的保證體系(xi)。人員、房屋 設(she)備滿足(zu)檢測(ce)工作需要。

1、人員要(yao)求

實驗室(shi)人(ren)員的(de)分類：管理人(ren)員、技術人(ren)員、技術支持(chi)人(ren)員等。

相應(ying)崗位的人員，應(ying)具備相應(ying)的技術能力，相應(ying)的技術能力證明（證書(shu)及證件）。

微(wei)生物檢驗室因有相應技術(shu)(shu)能(neng)力的人負責室內的技術(shu)(shu)工(gong)作。并設立(li)質量監督員。

2、房屋條件要求(qiu)

房屋要求：具有適(shi)宜、足(zu)夠寬敞、通風有良好(hao)的照(zhao)明。

房屋內墻面(mian)及地等應采(cai)用易于(yu)清(qing)潔的材料(liao)，保(bao)持(chi)房間清(qing)潔。

房(fang)間的設置，以(yi)其(qi)開(kai)展的工作內容加以(yi)分用(yong)，設立專用(yong)房(fang)間。

房間的大小還應根據從(cong)事實驗(yan)人員的進(jin)入數量上加(jia)以(yi)考慮(lv)。

3、環境設施要求(qiu)

專用房間的溫濕度控制與記錄（樣品存放室）

特殊環境的微(wei)生(sheng)物指標控制與(yu)記錄（無菌(jun)室等(deng)）

專用工作室的(de)標準(zhun)操作規程(cheng)(cheng)和定期的(de)檢測(ce)校準(zhun)程(cheng)(cheng)序。（潔凈室等）

特殊環境中的(de)專用設施質(zhi)量控制應符合有關要(yao)求（凈化工作臺）

微生物(wu)檢驗常用需監控(kong)的(de)設備和儀器：

1、培養箱(xiang)（生化培養箱(xiang)或CO2培養箱(xiang)等）、干(gan)燥箱(xiang)、高壓滅(mie)菌鍋(guo)、凈化工作臺、pH計、 冰箱(xiang)，（低溫冰箱(xiang)或冷柜）溫度計、紫外燈、顯(xian)微鏡、離(li)心(xin)機(ji)、天(tian)平、。

2、小計量(liang)容(rong)器

3、微(wei)(wei)生物測定儀器、微(wei)(wei)生物檢定儀器、空氣(qi)采樣器、酶標儀專用等。

1、高壓滅菌鍋(guo)的(de)溫度控制

高(gao)壓(ya)滅菌鍋；生(sheng)物指示菌法（常用）、化學(xue)變(bian)色紙片及高(gao)壓(ya)滅菌鍋溫度(du)計等方(fang)法進行(xing)檢(jian)測(ce)。

生物指示菌(jun)法是(shi)一種高(gao)壓滅(mie)菌(jun)鍋的效果顯示法。

高壓滅菌鍋由(you)專人按作(zuo)業(ye)(ye)指導書操作(zuo)，并(bing)做好每一次的作(zuo)業(ye)(ye)記錄。

高壓滅菌鍋使用(yong)時(shi)(shi)，內置物品不(bu)能(neng)太多，單(dan)位(wei)體積內的(de)內容物（每(mei)瓶內的(de)培養基）不(bu)能(neng)太多。同時(shi)(shi)應(ying)注意內容物不(bu)同耐受(shou)溫度。總(zong)的(de)暴露時(shi)(shi)間最好不(bu)要超過45min。

高(gao)壓滅菌鍋日(ri)常工作記錄應包含以下信(xin)息：高(gao)壓滅菌的材料、開始時(shi)間(jian)、壓力/溫度、取出時(shi)間(jian)、高(gao)壓滅菌膠帶的顏色變化（日(ri)常常用無菌培養代替(ti)）

高壓(ya)滅菌鍋溫度(du)波動(dong)范圍：110，115和121±2℃。

高壓滅菌鍋校準周(zhou)期一(yi)般在半年。

2、干燥滅菌箱(xiang)溫度控制

干燥滅菌箱日常工(gong)作記錄中(zhong)應包括以下信(xin)息：開始的時間(jian)、到達(da)滅菌溫度時的時間(jian)、取出的時間(jian)（或關閉時間(jian)）。

干燥滅菌箱的溫度校準；用參考溫度計進行溫度測試(shi)。

干燥滅菌(jun)箱溫度(du)要求與精(jing)確度(du)：160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者為滅菌(jun)2h，后者為30min。

干燥滅菌箱校準時(shi)間一(yi)般(ban)為(wei)一(yi)年。

3、培養(yang)基配(pei)制用蒸餾(liu)水的控制

對于蒸(zheng)餾水器來說：按設(she)備說明，定期清潔離(li)子交換器和更換離(li)子交換材(cai)料。

檢(jian)測(ce)要求：西歐標(biao)(biao)準為微生物檢(jian)驗(yan)用(yong)蒸餾水(shui)的特(te)定(ding)電導率(lv)＜0.5ms/m；細菌(jun)(jun)數＜50CFU/mL。我們(men)日常用(yong)的標(biao)(biao)準為 ＜10ms/m，未(wei)見有細菌(jun)(jun)指標(biao)(biao)。

檢測頻率：1次/每月。

蒸餾(liu)水定點供(gong)應，并做好(hao)相應的質量控制，記錄(lu)檢測結果。

4、天平(ping)的(de)管理

天平放置(zhi)要求(qiu)：無振動、無氣流影(ying)響及水平臺面上。

天平要有(you)使用(yong)及運行檢查記(ji)錄。

天平(ping)作(zuo)為(wei)計量儀器是列入國家強制檢(jian)定(ding)的(de)范圍，一(yi)般1次/年進(jin)行檢(jian)定(ding)。

運行(xing)檢查頻率按運行(xing)計劃(hua)或按產(chan)品（天平生產(chan)廠家）給出的標準重量單位進行(xing)對照

5、pH計(ji)

pH計使用(yong)前應(ying)用(yong)標(biao)準液進行(xing)校準。

緩沖(chong)液使(shi)用有效期(qi)：pH4.00 約1年

pH7.00 約6個月

pH9.00 約6個月(yue)

電極敏感性檢測及極性恢(hui)復。

6、凈化工作臺(tai)的(de)控制

水平(ping)流(liu)凈(jing)(jing)化(hua)工(gong)作臺工(gong)作區域(yu)，要求潔凈(jing)(jing)度為100級。空氣沉降30min，細(xi)菌(jun)數＜1個/皿。垂直流(liu)凈(jing)(jing)化(hua)工(gong)作臺，細(xi)菌(jun)數＜0.49個/皿.

凈化工作臺運行檢查頻(pin)次：1次/月主要是細菌沉降檢測。

凈化工作臺高效過濾膜一(yi)般為一(yi)年更換一(yi)次，并同時進(jin)行粒子與細菌沉降檢(jian)測(ce)。 

7、紫外線燈(deng)的控制

檢(jian)測(ce)(ce)方法：儀器(qi)測(ce)(ce)試法和生物(wu)測(ce)(ce)試法。前者是通過專用儀器(qi)檢(jian)測(ce)(ce)紫外(wai)(wai)燈管發射的紫外(wai)(wai)光(guang)強度。國家消毒技術(shu)規(gui)范(fan)中表明(ming)在距離照(zhao)射無1米(mi)處(chu)，要求其強度為90。

生(sheng)物測試法：采用一定的(de)菌培養物，經(jing)一定比例(li)稀釋(shi)，菌量(liang)控制在200-250個/0.5mL，涂布平板在紫(zi)外燈光下照射，2min，同時設置普通(tong)光源的(de)對照組，后置37℃48h，計算其殺滅(mie)率。要求殺滅(mie)率達99%。

8、顯微(wei)鏡的(de)控制

顯微鏡應制定(ding)作業指導書(shu)，日常維護記錄(lu)及(ji)自校記錄(lu)。

顯(xian)微(wei)鏡應置于無振動，避免(mian)灰(hui)塵，防(fang)潮等(deng)要求(qiu)的環境。

9、其它微生(sheng)物(wu)檢測(ce)專(zhuan)用儀器的控制

細菌(jun)鑒(jian)定儀、酶標(biao)儀等設備，工作中常(chang)用陽性(xing)(xing)對照檢(jian)測其功能正常(chang)性(xing)(xing)。

儀(yi)器的檢定(ding)則按有關的部門檢定(ding)或按自校(xiao)作業指導書進(jin)行。

儀器的使用(yong)登記、校(xiao)準(zhun)計劃、校(xiao)準(zhun)記錄等(deng)文件存檔(dang)。

儀器專人(ren)使(shi)用、操作者應(ying)取(qu)得相應(ying)的崗位(wei)培訓合格(ge)，持證上(shang)崗。

正確進行培養基質量(liang)(liang)控(kong)制，并作為一項經常性的(de)工作，建立完整(zheng)的(de)檢(jian)驗資(zi)料(liao)，是實驗室(shi)今后通過相應級別(bie)的(de)認證，在整(zheng)個檢(jian)驗質量(liang)(liang)控(kong)制體(ti)系中所(suo)必(bi)須具備的(de)文件資(zi)料(liao)。

1、常用培養(yang)基的質(zhi)量控(kong)制

檢(jian)驗項目與方法：對(dui)新批(pi)號的干燥培養基(ji)物理、化學及生物學指(zhi)標鑒(jian)定

A：感官（外觀）研細程度和顏色（溶(rong)解前(qian)后），透(tou)明(ming)度，雜質等(deng)；

B：PH測定，按各種(zhong)培養基(ji)要求的(de)PH±0.2，蒸餾(liu)水的(de)PH應(ying)在6.4-7.0之間。

C：生物(wu)學(xue)指標檢(jian)(jian)(jian)定，被檢(jian)(jian)(jian)培養基(ji)相(xiang)應(ying)細菌(jun)生長(chang)率測試；菌(jun)落大小及(ji)特(te)征(zheng)的檢(jian)(jian)(jian)測。

生長(chang)率測試(shi)：適用與液體(ti)和固體(ti)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)：將菌培(pei)(pei)養(yang)(yang)液，用生理鹽水做倍比稀釋，取合適稀釋度進(jin)行平板計數或接種被檢(jian)的(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)試(shi)管，同時以(yi)按相關的(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)國標配方新(xin)鮮配制的(de)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)(ji)進(jin)行對照。不低與10%。

菌(jun)落大小(xiao)測試：劃線分離測試菌(jun)，取10個菌(jun)落測量(liang)直徑大小(xiao)，其直徑均值與新鮮配制的培(pei)養基無統計(ji)學差異。

2、常用培養基質量標準

外(wai)觀和理化標準：

干粉顏(yan)(yan)色：淡黃色粉末或呈現本培養基(ji)特有的顏(yan)(yan)色

溶解后培養(yang)基色澤(ze)：清晰(xi)透明（含瓊(qiong)脂除外）淡黃色或(huo)特有的色澤(ze)；

滅菌(jun)后(hou)的培養基PH：7.2±2℃為多；個別弧菌(jun)檢驗用培養基pH值偏高為：8.0 ±2℃

生物學指標：菌落特征及菌落大小(xiao) 。

3、培(pei)養(yang)基保存環境(jing)

制(zhi)成的(de)培養(yang)基保存(cun)環境為4℃冰(bing)箱，如制(zhi)成平板則用塑料袋包裝(zhuang)置冰(bing)箱保存(cun)，干(gan)燥培養(yang)基干(gan)粉含有(you)活性物質(zhi)、遇(yu)熱易分解的(de)物質(zhi)應仔細查(cha)看存(cun)放條件(jian)，多(duo)數也須放在2-8 ℃條件(jian)保存(cun)。

有(you)(you)的培養基(ji)則以存放于10-15 ℃條件(jian)為(wei)易。如(ru)含(han)有(you)(you)高濃(nong)度膽(dan)鹽的培養基(ji)。

4、培養基制(zhi)備(bei)控制(zhi)程序(xu)

培養基配(pei)制所用(yong)的(de)儀(yi)器設備培養基配(pei)制所用(yong)的(de)儀(yi)器設備必須經過相應(ying)的(de)鑒定 。

配制培養(yang)基(ji)所用(yong)的(de)用(yong)具及容(rong)器配制培養(yang)基(ji)所用(yong)的(de)用(yong)具及容(rong)器必(bi)須(xu)是清潔(jie)或是滅菌的(de)，一些特殊不易洗(xi)刷清潔(jie)的(de)玻璃(li)器皿(min)，必(bi)要時可用(yong)重鉻(ge)酸(suan)鉀硫酸(suan)清潔(jie)浸泡后(hou)(hou)，取出置5%氫(qing)氧化鈉(na)溶液浸泡數分鐘，再用(yong)3%鹽酸(suan)溶液進行中和，然(ran)后(hou)(hou)用(yong)清水沖洗(xi)，烘干后(hou)(hou)備(bei)用(yong)。

5、培養(yang)基配制(zhi)原料，試劑質量控(kong)制(zhi)

配制好的培(pei)養(yang)基（尤其是糖發酵(jiao)管）不(bu)宜久放。，因為(wei)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)基吸收空氣(qi)中的二氧(yang)化碳，會使培(pei)養(yang)基變酸，從(cong)而影響細菌的生長。

培(pei)養基中的抑制劑及指示劑一(yi)定(ding)要精確(que)稱量，抑制劑要注意合(he)理配伍。 

6、培(pei)養(yang)基(ji)主(zhu)要原料的質(zhi)量控(kong)制

配制(zhi)培養(yang)基的(de)主(zhu)要原料(liao)有蛋(dan)白胨、牛肉浸(jin)膏、酵母浸(jin)膏、膽鹽、無機鹽和(he)瓊脂等，這(zhe)些(xie)主(zhu)要原料(liao)的(de)有劣(lie)，直接影響到培養(yang)基的(de)質量(liang)，由此也(ye)將(jiang)影響檢驗質量(liang)。

指標有感官(guan)、理化、物(wu)理、生物(wu)學。

定期使(shi)用有證(zheng)標準物質(zhi)和次(ci)級標準物質(zhi)（參考物質(zhi)）進(jin)行(xing)(xing)內部質(zhi)量控(kong)制。實(shi)驗室間的比對(dui)或能力驗證(zheng)，利用相同或不(bu)同方(fang)法(fa)進(jin)行(xing)(xing)重復(fu)檢測，對(dui)留存的樣(yang)品進(jin)行(xing)(xing)在檢測。

1、菌落計數精密(mi)度控(kong)制直(zhi)接計數

選擇同一標(biao)本(ben)，要求檢驗人員進行菌(jun)落計數。

將大腸菌（25922）或經檢定標(biao)化的菌片，通過(guo)合適的梯度(du)稀釋，選擇合適的稀釋度(du)進(jin)行菌落計(ji)數(shu)實驗操作(zuo)。36±1℃培養24h進(jin)行菌落計(ji)數(shu)。

菌落計數精密度控(kong)制重復(fu)計數法

2、重(zhong)復計(ji)數要求

自身(shen)同一平(ping)皿重復計數誤差(cha) 小于(yu)7.7%

實驗人員之間(jian)同一平皿重復計數(shu)誤差 ±18 .2%

自身同一梯度平(ping)行加樣兩(liang)皿間相(xiang)對(dui)誤(wu) 小于7.7%

實驗(yan)人(ren)員之間同一梯度(du)計(ji)數(shu)誤(wu)差X±18 .2%范圍

不同梯度間菌落(luo)計數最終誤(wu)差 小于7.7%

3、菌種鑒定質(zhi)控

菌種(zhong)鑒(jian)定(ding)質控要求(qiu)，對所給的微(wei)生物菌種(zhong)，按有關(guan)的方(fang)法及指標進行(xing)生化、血清等方(fang)面的鑒(jian)定(ding)。

鑒(jian)定質量評價：鑒(jian)定程(cheng)序(xu)是(shi)否(fou)正確；鑒(jian)定方法是(shi)否(fou)正確；具體操作技(ji)術是(shi)否(fou)熟練，結(jie)果報告是(shi)否(fou)正確。每(mei)一項設立分(fen)值為25分(fen)。總分(fen)為100分(fen)。

4、內部質量控制的推薦(jian)頻率

菌落(luo)計數精密度(du)控制：1次/3月(yue)；

菌種鑒(jian)定(ding)控制(zhi)：1次(ci)/半年或1年

盲(mang)樣測定丟(diu)失的(de)對照 1次(ci)/半年

1、培訓與告之

    實(shi)驗室管理人(ren)員及實(shi)驗人(ren)員必須了(le)解相關工(gong)作(zuo)(zuo)有(you)關的(de)危險(xian)。對招收(shou)新職工(gong)、工(gong)作(zuo)(zuo)開始(shi)發生變化或使用(yong)(yong)新方法，啟用(yong)(yong)新的(de)設備時，這點(dian)尤為重要(yao)。所有(you)工(gong)作(zuo)(zuo)人(ren)員，包括清潔和服務人(ren)員都(dou)要(yao)知(zhi)道。需要(yao)進行口頭和書面兩種(zhong)方式的(de)通知(zhi)。有(you)關儀器必須要(yao)有(you)字(zi)跡(ji)清楚其安全使用(yong)(yong)的(de)書面說明。

2、標志

在進行致病性微生物工作(zuo)的房間人口處必須要(yao)有警示(shi)標志。

實(shi)驗室的(de)房間必須(xu)以使與微生(sheng)物有關的(de)危(wei)險得(de)以過免的(de)方式裝置，以使微生(sheng)物的(de)傳播得(de)到限制，房間還應便于清(qing)潔和消(xiao)除(chu)污染．工作臺必須(xu)由光(guang)滑的(de)、耐消(xiao)毒劑的(de)材(cai)料制成。難以清(qing)潔的(de)角落、彎頭及(ji)管道應盡可能(neng)地避免污染。 

3、防止空(kong)氣污染

加熱培養蒙(meng)或(huo)(huo)其(qi)它化學物(wu)質時，粉塵可擴(kuo)做到空氣中．這可給工(gong)作人(ren)員(yuan)帶來過(guo)敏反(fan)應或(huo)(huo)出現其(qi)它問題(ti)．因此(ci)，設(she)計排(pai)風(feng)裝置(zhi)很重要，以(yi)至包括天平附近(jin)的抽風(feng)點。通常稱量應按正確的安全規程進(jin)行。 

4、有毒有害(hai)物防護(hu)

濃(nong)酸和堿及(ji)其它(ta)腐蝕性(xing)化(hua)學物質和毒(du)性(xing)物質必須專門保存，盡(jin)可能鎖(suo)存，以使它(ta)們引起的損害減(jian)至最低．

對實驗室(shi)所用的所有化學物質，實驗室(shi)必須有記述其危險及(ji)操(cao)作(zuo)中可能的限制的產(chan)品表．

在(zai)所需的(de)(de)范(fan)圍內工作人(ren)員必須使(shi)用人(ren)體防護(hu)(hu)裝置，防護(hu)(hu)服(fu)、手套(tao)籌．使(shi)用安(an)全設(she)施是實驗人(ren)員的(de)(de)職(zhi)責污染(ran)了的(de)(de)防護(hu)(hu)員應盡快地(di)更換(huan)，離開(kai)工作室(shi)時，必須脫去。

5、消除污染和(he)廢物的處理

實驗室(shi)必(bi)須(xu)要(yao)有關于應如何(he)消除濺出的微生(sheng)物(wu)污染(ran)的書面說明。另外，對廢物(wu)的處理(li)，如用過的培養(yang)皿和打碎的玻璃器皿，應有固定的程序。所有被洗的物(wu)品在洗刷前均經高(gao)壓滅菌，洗滌工受(shou)微生(sheng)物(wu)感染(ran)的危險(xian)就可以盡可能避免。