TSKgel色譜柱在單抗藥物研發(fā)中的應(yīng)用實(shí)例

   與傳統(tǒng)小分子藥不同，單抗類蛋白藥是非均一性的結(jié)構(gòu)復(fù)雜的大分子，因此使這類原研藥或仿制藥的研發(fā)與質(zhì)控工作難度增大。通過(guò)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC/MS），結(jié)合蛋白分子量的測(cè)定、異構(gòu)體、氨基酸修飾、糖基化修飾以及聚集情況分析等多種檢測(cè)手段，可對(duì)單抗類藥物進(jìn)行全面的結(jié)構(gòu)表征。

    在文獻(xiàn)《Physicochemical and Functional Comparability Between the Proposed Biosimilar Rituximab GP2013 and Originator Rituximab》中提到了將利妥昔單抗與其生物類似藥（GP2013）之間，針對(duì)各項(xiàng)物化性質(zhì)和功能性指標(biāo)進(jìn)行了對(duì)比分析試驗(yàn)。

    利用尺寸排阻色譜法（SEC）的分子空間結(jié)構(gòu)不同的原理可對(duì)抗體的多聚體、抗體片段以及PEG蛋白等進(jìn)行有效分析。在該文獻(xiàn)中，對(duì)原研和仿制藥樣品的非均一性分析（抗體聚集情況分析）時(shí)使用了TSKgel G3000SWXL色譜柱（請(qǐng)參照該文獻(xiàn)2.12 SEC,CE-SDS,AF4部分）。

    硼酸鹽親和色譜法多用于對(duì)糖或糖蛋白等生物分子進(jìn)行分離。該文獻(xiàn)中，使用了親和色譜柱TSKgel Boronate-5PW對(duì)GP2013樣品中糖基化和未糖基化的抗體異構(gòu)體進(jìn)行了分離。（請(qǐng)參照該文獻(xiàn)2.13 Boronate Affinity Chromatography部分）

    在該文獻(xiàn)2.14 Glycan Analysis部分中，通過(guò)N-糖苷酶F來(lái)釋放單克隆抗體Fc部分上的糖鏈，并對(duì)游離的N-末端糖鏈進(jìn)行2-AB熒光標(biāo)記后進(jìn)行糖基化分析。其中使用到了TSKgel Amide-80（2.0 mm ID X 15 cm，3 um）色譜柱用來(lái)分離2-AB標(biāo)記的糖鏈。

    TSKgel Amide-80親水相互作用（HILIC）色譜柱適用于親水性低分子、核酸以及糖類等化合物的分離分析。在單抗藥物分析應(yīng)用上，TSKgel Amide-80常用來(lái)分析結(jié)合在抗體上的糖鏈的結(jié)構(gòu)差異性。

    為了滿足廣大色譜工作者對(duì)抗體藥高效分析的需求，東曹公司作為分離純化產(chǎn)品的生產(chǎn)商，不斷致力于開(kāi)發(fā)出在色譜分離度、靈敏度以及分析速度上具有革命性提升的色譜柱產(chǎn)品。特別是在對(duì)抗體藥物質(zhì)量控制中的HPLC檢測(cè)方法上可以提供完備的解決方案。