常見實驗空白試驗總結
2018-08-06
作者：
瀏(liu)覽數：1285
國標中空白(bai)試驗的(de)定義
空白試(shi)(shi)(shi)驗：除(chu)不加試(shi)(shi)(shi)樣外，采用(yong)完(wan)全相同(tong)的(de)分析步驟(zou)、試(shi)(shi)(shi)劑和用(yong)量(滴(di)定法中標準滴(di)定液的(de)用(yong)量除(chu)外)，進行(xing)平行(xing)操作(zuo)所得的(de)結(jie)果(guo)。用(yong)于扣除(chu)試(shi)(shi)(shi)樣中試(shi)(shi)(shi)劑本底和計算方法的(de)檢出(chu)限(xian)。
空(kong)白做(zuo)不好(hao)會怎(zen)樣(yang)?
空(kong)白試(shi)驗測得(de)的結(jie)果稱(cheng)為空(kong)白試(shi)驗值(zhi)。在進行樣品分析(xi)(xi)時所(suo)得(de)的值(zhi)減去空(kong)白試(shi)驗值(zhi)得(de)到(dao)的才是(shi)最終分析(xi)(xi)結(jie)果。
空白試驗是實驗室質量控制(zhi)的重(zhong)要環節(jie)，其準(zhun)(zhun)確(que)性對提高檢(jian)測結果的準(zhun)(zhun)確(que)度至(zhi)關重(zhong)要。
空白試(shi)(shi)驗值反應(ying)了(le)測(ce)試(shi)(shi)儀器的噪(zao)聲、試(shi)(shi)劑中的雜質、環境及操作(zuo)過程(cheng)中的沾污等因素對樣品(pin)測(ce)定產生的綜合影(ying)響，直接關系到(dao)測(ce)定的最終(zhong)結果的準確(que)性(xing)。
空(kong)(kong)白試(shi)(shi)(shi)驗值(zhi)低(di)，數據離散程度小，分(fen)析結(jie)果的(de)精度隨之提高，它表明(ming)分(fen)析方法(fa)和分(fen)析操作者的(de)測(ce)試(shi)(shi)(shi)水平較(jiao)高。當空(kong)(kong)白試(shi)(shi)(shi)驗值(zhi)偏高時，應全面檢查試(shi)(shi)(shi)驗用水、試(shi)(shi)(shi)劑、量器和容(rong)器的(de)沾污情況、測(ce)量儀器的(de)性能及試(shi)(shi)(shi)驗環(huan)境的(de)狀態(tai)等，以便(bian)盡可能地降低(di)空(kong)(kong)白試(shi)(shi)(shi)驗值(zhi)。
做酸堿(jian)滴定(ding)時(shi)為(wei)什么要(yao)做空(kong)白試驗?
因為用(yong)作稀(xi)釋液(ye)(ye)的(de)空(kong)白(bai)溶(rong)液(ye)(ye)有一定的(de)酸堿度(du)，會影(ying)響滴定結(jie)果，所以要做空(kong)白(bai)試驗，來扣除空(kong)白(bai)的(de)干擾。比如空(kong)白(bai)溶(rong)液(ye)(ye)為酸性，這時候用(yong)堿滴定此溶(rong)液(ye)(ye)，得到的(de)結(jie)果會偏(pian)高，要扣除空(kong)白(bai)溶(rong)液(ye)(ye)的(de)酸度(du)，得到的(de)酸度(du)才正確。
石墨爐測鉛時,空白(4硝酸(suan)+1高氯(lv)酸(suan)GR)值總是較高,與灰化(hua)法的結(jie)果(guo)不大(da)一致(zhi)(樣(yang)品為(wei)植(zhi)物樣(yang))。
【分析】1. 所用的(de)水為用石英亞沸水蒸餾(liu)器蒸餾(liu)得到的(de)，先打一(yi)下(xia)空(kong)白，一(yi)般不會超(chao)過0.0015，然后(hou)采用的(de)為硝(xiao)酸(工藝超(chao)純(chun))和高氯酸(優極純(chun))消化，最后(hou)溶解(jie)用的(de)1摩(mo)爾(er)每升的(de)鹽酸或硝(xiao)酸(結果差不多，只是鹽酸穩定性要好一(yi)點(dian))，定容體積(ji)為50mL的(de)話空(kong)白值一(yi)般為0.03左右。不過鉛比較難做(zuo)，基體干擾很大。
2. 空白(bai)問題來自(zi)多方面(mian)，上面(mian)說(shuo)的水(shui)與(yu)試(shi)劑外，你用(yong)的氬(ya)氣是高純(chun)的嗎?也可用(yong)高純(chun)氮氣，但要注(zhu)意(yi)分子帶(dai)背(bei)景
3. 可能來(lai)自由你(ni)所(suo)(suo)用(yong)的(de)(de)硝酸和高氯酸不(bu)純(chun)所(suo)(suo)致。你(ni)可以先測(ce)空管，然后測(ce)你(ni)所(suo)(suo)用(yong)的(de)(de)水(shui)，再測(ce)含(han)酸的(de)(de)水(shui)空白(bai)看(kan)看(kan)就知(zhi)道了(le)
4.有可能是(shi)試液的酸(suan)(suan)度過(guo)大(da)會影響測定，特別是(shi)使用(yong)高(gao)氯酸(suan)(suan)，影響更大(da)，酸(suan)(suan)度大(da)對(dui)(dui)石墨(mo)爐(lu)損(sun)害也比較(jiao)大(da)。對(dui)(dui)于石墨(mo)爐(lu)測定鉛，濕法(fa)消化最好使用(yong)微波(bo)消化，使用(yong)硝酸(suan)(suan)和雙氧水，這樣空白中酸(suan)(suan)度比較(jiao)容(rong)易控制，空白也比較(jiao)低(di)。
5. a.實際(ji)Pb含量(liang)有出入，廠家(jia)就沒有測準(zhun);b.儀器(qi)可能沒有調(diao)制最佳。
7.石(shi)墨(mo)爐測鉛使(shi)用(yong)高(gao)(gao)(gao)氯(lv)酸(suan)(suan)加+硝酸(suan)(suan)消解(jie)的(de)樣(yang)品(pin)測定(ding)空白(bai)不(bu)穩定(ding)而且很高(gao)(gao)(gao)這個問題(ti)沒(mei)有分(fen)析(xi)到點(dian)子(zi)上。這個故障的(de)實(shi)際問題(ti)不(bu)是(shi)(shi)試劑不(bu)純引起(qi)的(de)，是(shi)(shi)因(yin)為在消解(jie)時無論如何趕酸(suan)(suan)都很難(nan)完全把高(gao)(gao)(gao)氯(lv)酸(suan)(suan)除去，因(yin)為高(gao)(gao)(gao)氯(lv)酸(suan)(suan)是(shi)(shi)高(gao)(gao)(gao)沸點(dian)酸(suan)(suan)。這樣(yang)在最后(hou)分(fen)析(xi)樣(yang)品(pin)時殘留的(de)酸(suan)(suan)就是(shi)(shi)高(gao)(gao)(gao)氯(lv)酸(suan)(suan)。高(gao)(gao)(gao)氯(lv)酸(suan)(suan)會(hui)在石(shi)墨(mo)爐升溫灰化階段分(fen)解(jie)出氧(yang)氣(qi)和氯(lv)化氫(qing)。一方(fang)面(mian)氯(lv)離子(zi)會(hui)在最后(hou)原子(zi)化階段產生非特(te)征吸收，另一方(fang)面(mian)氧(yang)氣(qi)會(hui)和石(shi)墨(mo)管(guan)中的(de)石(shi)墨(mo)反應(ying)燒蝕石(shi)墨(mo)管(guan)。所(suo)以石(shi)墨(mo)管(guan)測定(ding)含高(gao)(gao)(gao)氯(lv)酸(suan)(suan)的(de)樣(yang)品(pin)損壞(huai)速度特(te)別快。相(xiang)對來說(shuo)高(gao)(gao)(gao)密石(shi)墨(mo)管(guan)壞(huai)的(de)比(bi)涂層管(guan)和平臺管(guan)都快的(de)多(duo)，基本用(yong)不(bu)過20次就斷(duan)了。這可能是(shi)(shi)造(zao)成實(shi)驗不(bu)穩定(ding)的(de)真實(shi)原因(yin)。
原(yuan)(yuan)子(zi)熒光空白偏高原(yuan)(yuan)因
1.測(ce)定介(jie)質的(de)選擇及濃度的(de)影響
選擇HNO3、HCl、HClO4、H3PO4和(he)H2SO4等(deng)進行了實驗，結果表明:以HClO4和(he)H3PO4作介質響應值較低(di)，汞(gong)在(zai)H2SO4溶(rong)液(ye)中能(neng)得到較大靈(ling)敏度，但空白(bai)值也(ye)高。汞(gong)在(zai)HNO3和(he)HCl溶(rong)液(ye)中的(de)熒(ying)(ying)光強(qiang)度差別不大。在(zai)5%一25%的(de)硝酸和(he)5%一20%的(de)鹽酸中熒(ying)(ying)光強(qiang)度基本穩(wen)定。
2.酸的影響
作(zuo)為原(yuan)子熒(ying)(ying)光的(de)(de)(de)(de)載流(liu)和標準試劑的(de)(de)(de)(de)基體(ti)，酸(suan)對原(yuan)子熒(ying)(ying)光的(de)(de)(de)(de)影響(xiang)十分的(de)(de)(de)(de)突(tu)出。一(yi)般在原(yuan)子熒(ying)(ying)光中(zhong)使(shi)用(yong)的(de)(de)(de)(de)酸(suan)主(zhu)要有兩種-鹽酸(suan)和硝酸(suan)。我們習慣上(shang)使(shi)用(yong)鹽酸(suan)。如果(guo)購買(mai)市場上(shang)質量(liang)差的(de)(de)(de)(de)酸(suan)，對空白的(de)(de)(de)(de)影響(xiang)要大得多。
3.還原(yuan)劑的(de)影響(xiang)
作為(wei)(wei)原(yuan)(yuan)(yuan)子熒光(guang)的(de)(de)還(huan)原(yuan)(yuan)(yuan)劑(ji)，一般使用(yong)最多的(de)(de)是硼氫化鉀或硼氫化鈉，在原(yuan)(yuan)(yuan)子熒光(guang)法中，還(huan)原(yuan)(yuan)(yuan)劑(ji)對樣品以及空白值的(de)(de)影響主要體(ti)現在它的(de)(de)用(yong)量(liang)。硼氫化鉀濃(nong)度不宜超過3.0%。實驗表明，當硼氫化鈉濃(nong)度為(wei)(wei)1%時，靈敏(min)度和穩定性(xing)好，并且(qie)有(you)效(xiao)消除干(gan)擾。
4.燈電流的影(ying)響
一般來說燈電(dian)流(liu)與(yu)負高(gao)壓對(dui)原子熒(ying)光的(de)(de)(de)(de)影(ying)響(xiang)是同(tong)方向的(de)(de)(de)(de)。提高(gao)燈電(dian)流(liu)，空白值就相應的(de)(de)(de)(de)提高(gao)。空白值太大的(de)(de)(de)(de)話，可(ke)(ke)以適當的(de)(de)(de)(de)降低電(dian)流(liu)值，使儀(yi)器(qi)的(de)(de)(de)(de)靈敏(min)度(du)降低，減少標(biao)準(zhun)空白的(de)(de)(de)(de)背景值，使所測的(de)(de)(de)(de)數據準(zhun)確、可(ke)(ke)靠，但(dan)是如(ru)果(guo)電(dian)流(liu)過小，靈敏(min)度(du)也將變小，對(dui)所測樣品的(de)(de)(de)(de)影(ying)響(xiang)就會(hui)增(zeng)加，所以選(xuan)擇合適的(de)(de)(de)(de)燈電(dian)流(liu)，保證一定的(de)(de)(de)(de)空白值與(yu)靈敏(min)度(du)才是關鍵。
5.載氣(qi)的影(ying)響
實驗表明，當氬氣(qi)流(liu)速(su)較低時，測定(ding)的(de)靈敏較高.但結(jie)果的(de)變動性加(jia)大，實際測定(ding)取(qu)氬氣(qi)流(liu)速(su)200ml/hifn，此時測定(ding)的(de)靈敏度較高，相對(dui)標準偏差可以接(jie)受。
空白色(se)譜柱出峰，什(shen)么(me)原(yuan)因?
高(gao)效液相(xiang)色(se)(se)(se)譜，色(se)(se)(se)譜柱是Kromasil C18(15cm*5Um)，流動(dong)相(xiang)為10%乙(yi)腈和(he)90%三氟乙(yi)酸水，走空(kong)白色(se)(se)(se)譜柱時在(zai)(zai)整(zheng)個保留(liu)時間(jian)的中間(jian)位(wei)置(zhi)出(chu)現較大的色(se)(se)(se)譜峰，走了好幾(ji)針空(kong)白，每針的響(xiang)應(ying)都(dou)不(bu)同，有(you)的很高(gao)，有(you)的又很低，但雜峰一(yi)直存在(zai)(zai)，不(bu)像是色(se)(se)(se)譜柱里(li)有(you)雜質，用流動(dong)相(xiang)沖洗后依然出(chu)現此(ci)問題，什么原因(yin)?
【原因】
1、確定檢測波(bo)長，如果是(shi)末端(duan)吸(xi)收，排除三氟(fu)乙酸的干(gan)擾。
2、使用100%乙(yi)腈作為(wei)流動相(xiang)，乙(yi)腈作為(wei)樣(yang)品(pin)進樣(yang)，如果為(wei)基線，則說明色譜(pu)柱及系統完好。
3、然后在換(huan)流動相為10%乙腈(jing)和90%三氟乙酸(suan)水，樣品為乙腈(jing)，如果有上述“中(zhong)間(jian)位置(zhi)出現(xian)較大的色譜峰”，那說(shuo)明八成問(wen)題在三氟乙酸(suan)上，或(huo)者(zhe)稀釋(shi)三氟乙酸(suan)的水上。
4、如(ru)果上述2、3都有“中間位置出(chu)現較大(da)的(de)色譜(pu)峰”，檢查(cha)檢測器(qi)及(ji)進樣器(qi)。
5、這些還不能解(jie)決，聯系儀器工程師
空白乙(yi)腈出(chu)峰，什么原因?
高效液相色(se)譜儀(yi)，進空白乙(yi)腈(jing)，在(zai)樣(yang)品峰(feng)(feng)位(wei)子出(chu)(chu)現倒峰(feng)(feng)，進雙蒸水(shui)在(zai)樣(yang)品峰(feng)(feng)出(chu)(chu)現正峰(feng)(feng)，進樣(yang)品時有雜峰(feng)(feng)干擾，我已經(jing)排除了(le)(le)水(shui)和(he)乙(yi)腈(jing)的問題，不(bu)知(zhi)道(dao)是(shi)不(bu)是(shi)進樣(yang)池或者檢(jian)測(ce)器污染了(le)(le)，已經(jing)整了(le)(le)10多(duo)天(tian)，還(huan)是(shi)沒效果(guo)，請(qing)指教原因和(he)解決辦法(fa)。
【分析】
液(ye)相(xiang)中(zhong)出現倒峰，主要原因是樣品吸(xi)(xi)收比流(liu)動相(xiang)吸(xi)(xi)收小，所以排(pai)除影(ying)響，不僅要考(kao)慮進樣系(xi)統(tong)(tong)污(wu)(wu)染和檢(jian)測(ce)池(chi)污(wu)(wu)染，還要考(kao)慮流(liu)動相(xiang)和色譜(pu)柱(zhu)的(de)影(ying)響。換一根柱(zhu)子試(shi)試(shi)，考(kao)察(cha)系(xi)統(tong)(tong)的(de)情(qing)況，如果照舊，就排(pai)除色譜(pu)柱(zhu)的(de)影(ying)響，然后更(geng)換流(liu)動相(xiang)試(shi)試(shi)，再(zai)以后清洗進樣系(xi)統(tong)(tong)和檢(jian)測(ce)池(chi)等等。
或將色譜柱從系(xi)統(tong)中斷開(kai)，直接用乙腈或水做流動(dong)相清洗檢測器就(jiu)可以知(zhi)道是(shi)否(fou)是(shi)檢測器受污(wu)染，如(ru)果基(ji)線(xian)正(zheng)常，再(zai)檢查(cha)你的進樣系(xi)統(tong)，樣品，前處理是(shi)否(fou)有問(wen)題，如(ru)果都沒問(wen)題，就(jiu)去檢查(cha)色譜柱吧(ba)。
水質分析中氨氮的測定空白值很高的原因
實驗中納氏試劑(ji)和酒石酸(suan)鉀鈉(na)對(dui)空白值的(de)高低影響很大(da)，可能原(yuan)因如下：
1.測定使用的蒸餾(liu)水被(bei)污(wu)染，含有影響實驗結果的雜質，比如蒸餾(liu)水含氨。
2.試管、移液管等儀器沒(mei)有清(qing)洗(xi)徹底，這(zhe)些因素對實驗結果也有較大(da)的影響。
3.實(shi)(shi)驗(yan)所用的(de)(de)無氨水質量不(bu)佳(jia)，含氨量比較高，導致實(shi)(shi)驗(yan)得到的(de)(de)空白(bai)值(zhi)偏(pian)高，這是最主要的(de)(de)原因(yin)。
4.在配制酒石酸(suan)鉀(jia)(jia)鈉(na)和鈉(na)氏(shi)試(shi)劑時(shi)出現較大偏(pian)差，導致實(shi)驗(yan)所用的(de)試(shi)劑純度(酒石酸(suan)鉀(jia)(jia)鈉(na)、鈉(na)氏(shi)試(shi)劑)不佳，從(cong)而導致實(shi)驗(yan)得(de)到的(de)空白值偏(pian)高。
總氮空白值偏(pian)高(gao)，什么(me)原因?
1、試劑的配制
堿性過(guo)(guo)硫(liu)酸鉀的配(pei)(pei)(pei)制(zhi)(zhi)過(guo)(guo)程十分(fen)重要，掌握不好，會影響消解效果，對測(ce)定(ding)結果產生一定(ding)的影響。配(pei)(pei)(pei)制(zhi)(zhi)該(gai)溶(rong)液時(shi)，可分(fen)別稱取過(guo)(guo)硫(liu)酸鉀和氫(qing)(qing)氧化(hua)鈉，兩者分(fen)開配(pei)(pei)(pei)制(zhi)(zhi)，再混合定(ding)容，或(huo)者先(xian)配(pei)(pei)(pei)制(zhi)(zhi)氫(qing)(qing)氧化(hua)鈉溶(rong)液，待其溫(wen)度(du)降(jiang)到室(shi)溫(wen)后再加入過(guo)(guo)硫(liu)酸鉀溶(rong)解。若(ruo)二者在一只燒杯中溶(rong)于水，應(ying)緩慢加水，同(tong)時(shi)攪拌，防(fang)止氫(qing)(qing)氧化(hua)鈉放(fang)熱使溶(rong)液溫(wen)度(du)過(guo)(guo)高引(yin)起(qi)局部(bu)過(guo)(guo)硫(liu)酸鉀失(shi)效。
2、玻璃(li)器皿的(de)洗滌
所使用(yong)(yong)(yong)的玻璃器皿(min)應先用(yong)(yong)(yong)(1+9)鹽酸浸泡后(hou)，再用(yong)(yong)(yong)無氨水沖洗數次才能(neng)使用(yong)(yong)(yong)，否則，也會造成空白(bai)值(zhi)偏(pian)高或平行(xing)性較差(cha)的情況。
3、比色(se)時的注(zhu)意事項
該項目的(de)(de)測定涉及兩個(ge)波(bo)長(chang)(220nm和275nm)，建議在測定完(wan)一(yi)(yi)組(zu)樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)同一(yi)(yi)波(bo)長(chang)后，再調(diao)整(zheng)到(dao)另一(yi)(yi)波(bo)長(chang)，統一(yi)(yi)測定，不要測完(wan)一(yi)(yi)個(ge)樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)兩個(ge)吸光度后再換另一(yi)(yi)個(ge)樣(yang)品(pin)(pin)，這樣(yang)反復調(diao)整(zheng)波(bo)長(chang)會引起一(yi)(yi)定的(de)(de)測量誤差。
4、試劑的選擇
堿性過(guo)(guo)硫(liu)酸鉀(jia)消解(jie)紫外分(fen)光(guang)光(guang)度法測定總(zong)氮(dan)的(de)過(guo)(guo)程中(zhong)，過(guo)(guo)硫(liu)酸鉀(jia)是(shi)至關重要(yao)的(de)試(shi)劑(ji)(ji)。首先(xian)，試(shi)劑(ji)(ji)的(de)純(chun)(chun)度關系到空(kong)白(bai)值(zhi)的(de)高(gao)(gao)低(di)、測定結(jie)果的(de)準確度。一般普通分(fen)析純(chun)(chun)過(guo)(guo)硫(liu)酸鉀(jia)的(de)總(zong)氮(dan)含(han)(han)量(liang)最(zui)高(gao)(gao)不(bu)超過(guo)(guo)0.005%，但由于試(shi)劑(ji)(ji)質量(liang)存在差異(yi)，有(you)(you)些(xie)廠家、批(pi)次的(de)試(shi)劑(ji)(ji)含(han)(han)氮(dan)量(liang)常(chang)常(chang)達(da)不(bu)到這個要(yao)求，致(zhi)使空(kong)白(bai)值(zhi)偏高(gao)(gao)。因此，有(you)(you)條件的(de)話(hua)建議使用優級純(chun)(chun)試(shi)劑(ji)(ji)，盡量(liang)降(jiang)低(di)試(shi)劑(ji)(ji)中(zhong)的(de)含(han)(han)氮(dan)量(liang)，從而降(jiang)低(di)實驗空(kong)白(bai)值(zhi)。
5、實(shi)驗(yan)用水及試(shi)劑(ji)的質(zhi)量(liang)檢驗(yan)
若(ruo)實(shi)驗的空白值不(bu)夠理想(xiang)，則需要對(dui)實(shi)驗用水(shui)及試劑(ji)(ji)進(jin)行檢(jian)驗，以選擇出(chu)含氮(dan)量最低的水(shui)和試劑(ji)(ji)，獲得(de)理想(xiang)的空白值。
粗蛋白(bai)測(ce)定(ding)空白(bai)偏高的影響因素?
可以從以下(xia)方面考慮：
1.配(pei)溶液的水換沒換;
2.看看消(xiao)化(hua)爐的回收率;
3.看(kan)看(kan)蒸餾儀(yi)的(de)回收率;
4.鹽(yan)酸在不在保(bao)質期內;
5.配(pei)溶(rong)液的硫酸是不是有問題;
小結(jie)
空(kong)白(bai)試驗是實驗室質量控(kong)制(zhi)的(de)重要環節，其準確(que)性對(dui)提高檢(jian)測結果的(de)準確(que)度至關重要。以(yi)分光光度法空(kong)白(bai)為例 ，要用(yong)相應的(de)實驗用(yong)純水或(huo)有機(ji)溶濟作參(can)(can)比(bi)，不能用(yong)空(kong)白(bai)實驗溶液做參(can)(can)比(bi)，以(yi)免人(ren)為減小空(kong)白(bai)值，從而(er)掩蓋空(kong)白(bai)實驗值的(de)變異 。
值得注意的(de)(de)是，通過計量認證的(de)(de)實(shi)驗室(shi)，由(you)于檢測儀器和玻(bo)璃量器定(ding)期(qi)檢定(ding) ，以及采取了全面的(de)(de)質量管理措施，因此，若測定(ding)的(de)(de)空白(bai)(bai)實(shi)驗值太大，一般(ban)是化學藥品純度不夠，配制的(de)(de)試液(ye)變(bian)質或被污(wu)染等(deng)原(yuan)因 。應重(zhong)新配制試液(ye) ，返工重(zhong)測該批樣品 ，直(zhi)至空白(bai)(bai)實(shi)驗值合格(ge)。
