2015年10月18日第四屆全(quan)國激(ji)光共聚焦顯微(wei)技術(shu)理論與應用學術(shu)交流研討會(hui)圓滿閉(bi)幕。

　　在14日(ri)下午的會議中，有(you)一(yi)個特邀報告格外地(di)引起(qi)了(le)筆者(zhe)的注意，來自(zi)西北農(nong)林科技大學(xue)動物醫(yi)學(xue)院的趙善廷(ting)教(jiao)授提到他曾與高壓冷凍固(gu)定技術的發(fa)明者(zhe)瑞(rui)士科學(xue)家Studer博士合作，將該技術與器(qi)官型(xing)腦片培養(yang)技術(organotypic slice culture)相結(jie)合，成(cheng)功(gong)地(di)研究(jiu)了(le)與學(xue)習和記憶密切有(you)關的長時程效應(long-term potentiation, LTP)對突觸的影響(xiang)。

西北農林科技大學動物醫學院的趙善廷教授

　　據了解，以(yi)往的常(chang)規(gui)電(dian)鏡技(ji)術需要先用甲醛(quan)、戊(wu)二(er)醛(quan)等化學(xue)試劑對(dui)樣品進行化學(xue)固定，但這種固定方法(fa)有(you)三個(ge)缺點包括(kuo)：

　　一、無法撲捉短(duan)暫生理過程的(de)形態變(bian)化(hua)(hua)(hua)和特征，如神(shen)經元(yuan)突觸小泡內神(shen)經遞質的(de)釋放；二、脫(tuo)水過程用酒精等有機溶劑(ji)(ji)會造(zao)成(cheng)細(xi)胞和組(zu)織皺(zhou)縮，使(shi)其形態和大小發生改變(bian)；三、化(hua)(hua)(hua)學固定(ding)劑(ji)(ji)特別是戊二醛可引起蛋白質變(bian)性，使(shi)其與相應(ying)抗體結合能(neng)力下降甚(shen)至喪失，導致電鏡免(mian)疫(yi)組(zu)化(hua)(hua)(hua)染(ran)色(se)失敗。

　　為克(ke)服化學固(gu)(gu)定(ding)(ding)的這些(xie)缺點，上世紀九十(shi)年代末，瑞士科學家Studer博士發明了一種新(xin)的物理(li)性電鏡固(gu)(gu)定(ding)(ding)技(ji)術，即高壓冷(leng)凍電鏡固(gu)(gu)定(ding)(ding)技(ji)術，該技(ji)術可以(yi)(yi)在不使(shi)用(yong)任何化學固(gu)(gu)定(ding)(ding)劑的條(tiao)件下五十(shi)毫秒(miao)以(yi)(yi)內(nei)將組(zu)織和(he)細胞完全固(gu)(gu)定(ding)(ding)。

　　雖然高壓冷凍技術克服(fu)了化學固定的三大缺點，但它(ta)本身也有一個(ge)不(bu)足(zu)之(zhi)處：固定的樣品非常小，直徑(jing)不(bu)能(neng)超(chao)過(guo)1mm，厚度不(bu)能(neng)超(chao)過(guo)μm，從而限制了它(ta)在神經生(sheng)物學研究中(zhong)的應用。

　　為了克服高(gao)壓(ya)冷(leng)凍(dong)固定技(ji)(ji)(ji)術的(de)缺(que)點，將(jiang)其應用(yong)到(dao)神(shen)經生物學研究(jiu)中，2002年，該(gai)技(ji)(ji)(ji)術發明者Studer博士與當時(shi)正在(zai)(zai)德國弗萊堡(bao)大學醫(yi)學院做博士后的(de)趙善廷(ting)博士合作(zuo)，將(jiang)器官型腦片培(pei)養技(ji)(ji)(ji)術和高(gao)壓(ya)冷(leng)凍(dong)固定技(ji)(ji)(ji)術相(xiang)結合固定神(shen)經纖維，歷時(shi)五(wu)年的(de)不斷摸索，到(dao)2007年兩種技(ji)(ji)(ji)術終于(yu)完美地結合在(zai)(zai)一起。趙教授在(zai)(zai)接受本網記(ji)者采(cai)訪時(shi)表(biao)示，希望(wang)能夠(gou)與國內相(xiang)關課題組合作(zuo)，為這種樣品制備方法尋找更多的(de)應用(yong)領域。

撰稿：史秀明