1973年(nian)(nian)，BD公司與(yu)美國(guo)斯坦福大學(xue)合(he)作，研制開發并生產了(le)世界(jie)第(di)(di)一(yi)臺(tai)商(shang)用流(liu)式細胞儀(yi)FACSⅠ;1979年(nian)(nian)，北京師范大學(xue)引進(jin)了(le)中(zhong)國(guo)第(di)(di)一(yi)臺(tai)流(liu)式細胞儀(yi)(FACS Ⅲ);1983年(nian)(nian)河北腫瘤(liu)研究所引進(jin)了(le)中(zhong)國(guo)第(di)(di)一(yi)臺(tai)分選(xuan)型流(liu)式細胞儀(yi)(FACS420)……

　　追溯歷(li)史，流(liu)式細胞儀(yi)走過了42年的(de)發(fa)(fa)(fa)展(zhan)歷(li)程(1973-2015)，在(zai)這四十(shi)多(duo)(duo)年的(de)發(fa)(fa)(fa)展(zhan)歷(li)程中，流(liu)式細胞儀(yi)器在(zai)結構上(shang)發(fa)(fa)(fa)生了一系列的(de)演(yan)變：由(you)(you)簡(jian)單到復雜(za)、由(you)(you)單激(ji)光(guang)到多(duo)(duo)激(ji)光(guang)、由(you)(you)單色(se)到多(duo)(duo)色(se)、由(you)(you)分析到分選、由(you)(you)空(kong)氣激(ji)發(fa)(fa)(fa)到石英杯(bei)激(ji)發(fa)(fa)(fa)、由(you)(you)標配型到特殊定制型等。總體來(lai)說(shuo)，流(liu)式細胞儀(yi)的(de)硬件發(fa)(fa)(fa)展(zhan)遠超科(ke)研發(fa)(fa)(fa)展(zhan)需要，但應(ying)用技術相(xiang)對(dui)滯后。

　　在第八屆(jie)中國生(sheng)命科(ke)學(xue)公共平臺管(guan)理與發展研討(tao)會的流式(shi)細胞(bao)儀(yi)技(ji)(ji)術(shu)論壇上(shang)，北京大學(xue)醫學(xue)部分析(xi)儀(yi)器中心(xin)細胞(bao)室吳(wu)后男主任不僅介紹了流式(shi)細胞(bao)儀(yi)的發展歷程，還指出了未來(lai)的發展趨勢。據其介紹，未來(lai)流式(shi)細胞(bao)儀(yi)趨向于多色標(biao)記(ji)、多參數、更精細、微觀指標(biao)觀察、稀有(you)細胞(bao)或多功(gong)能特性(xing)細胞(bao)的研究(jiu)，向高難度、挑戰(zhan)性(xing)技(ji)(ji)術(shu)邁(mai)進。

　　而(er)據(ju)第三軍醫大學(xue)醫學(xue)分(fen)析(xi)測(ce)試中心(xin)萬瑛教授(shou)介紹，多(duo)(duo)色流(liu)式(shi)(Multi-color Flow Cytometry)指同時使用多(duo)(duo)種(四(si)色以上(shang))顏(yan)色熒(ying)光標記的(de)流(liu)式(shi)檢測(ce)與分(fen)析(xi)，該技術是(shi)隨著新(xin)熒(ying)光分(fen)子(zi)的(de)不斷問世(shi)和流(liu)式(shi)細胞儀分(fen)析(xi)參數(shu)的(de)增加(jia)而(er)出現的(de)，是(shi)目前實現多(duo)(duo)參數(shu)細胞表(biao)型檢測(ce)的(de)主要手段(duan)。

　　不過，傳統的(de)流式技(ji)術主要(yao)基(ji)于(yu)對熒光發射光譜的(de)檢測(ce)，但(dan)熒光基(ji)團發射光譜一般比較寬，其間往(wang)往(wang)會(hui)(hui)發生重疊(die)。不僅(jin)限制了檢測(ce)通道(dao)的(de)數量(<20個)，還會(hui)(hui)帶來(lai)嚴(yan)重的(de)串(chuan)色問題，很多通道(dao)的(de)信號(hao)需要(yao)復雜的(de)補(bu)償計(ji)算(suan)。

　　為了解決這(zhe)些問題，最新的(de)(de)質譜流式細(xi)胞(bao)術(shu)(CyTOF)應運而生(sheng)。據(ju)萬瑛介(jie)紹，傳統的(de)(de)流式技術(shu)主要使(shi)用(yong)各種熒光基團作為抗體(ti)(ti)的(de)(de)標簽，使(shi)用(yong)激光器(qi)和(he)光電倍(bei)增管作為檢測手段，而CyTOF用(yong)金(jin)屬元素偶聯抗體(ti)(ti)作為標記手段，以ICP質譜為檢測手段，通過(guo)這(zhe)些改進，質譜流式技術(shu)巧妙的(de)(de)實現了更多參數的(de)(de)檢測。總體(ti)(ti)來說，CyTOF具有很多優(you)勢：通道多，通道數>110個，檢測范圍88-210Da;無漏光，通道間相(xiang)互影(ying)響小于(yu)0.3%，無需(xu)計算補償;背景低，標記元素在細(xi)胞(bao)內含量極低(<1原子(zi)/細(xi)胞(bao))等。不過(guo)，目前國內的(de)(de)CyTOF產品還(huan)比較(jiao)少。

　　大家(jia)都知道(dao)，最近(jin)的(de)諾(nuo)貝(bei)爾(er)醫學(xue)(xue)(xue)獎給了(le)兩位干(gan)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)研究者，John Gurdon和(he)Shinya Yamanaka，以(yi)獎勵他(ta)們在干(gan)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)研究和(he)體細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)重(zhong)(zhong)編程領(ling)域的(de)卓(zhuo)越貢獻(xian)，而流式(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)術(shu)天生(sheng)就(jiu)是在臨床和(he)研究領(ling)域分(fen)(fen)(fen)析、鑒定和(he)分(fen)(fen)(fen)離干(gan)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和(he)祖細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)理想工(gong)具。近(jin)20年來，隨著(zhu)流式(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)儀及其檢測技術(shu)的(de)日臻完善(shan)，樣品制(zhi)備、細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)標記、軟件開發等(deng)方(fang)面不斷獲得新突破，使得流式(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)儀已(yi)廣泛(fan)應用于免疫(yi)學(xue)(xue)(xue)、生(sheng)物化學(xue)(xue)(xue)、生(sheng)物學(xue)(xue)(xue)、腫瘤學(xue)(xue)(xue)以(yi)及血(xue)液學(xue)(xue)(xue)等(deng)方(fang)面的(de)研究和(he)臨床常規工(gong)作，成為(wei)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)分(fen)(fen)(fen)選(xuan)，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)周期分(fen)(fen)(fen)析，DNA倍(bei)體測定，免疫(yi)活性細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)分(fen)(fen)(fen)型純化，血(xue)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)分(fen)(fen)(fen)型分(fen)(fen)(fen)類，藥物在細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)中(zhong)的(de)分(fen)(fen)(fen)布，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋亡等(deng)工(gong)作中(zhong)重(zhong)(zhong)要的(de)研究工(gong)具。

　　從(cong)儀器類型上(shang)來(lai)說，目前市面上(shang)銷(xiao)售的(de)主要是(shi)(shi)兩(liang)種流式(shi)細(xi)(xi)胞(bao)儀，一(yi)種是(shi)(shi)分(fen)(fen)析(xi)(xi)(xi)式(shi)流式(shi)細(xi)(xi)胞(bao)儀，細(xi)(xi)胞(bao)樣本(ben)經(jing)這種儀器分(fen)(fen)析(xi)(xi)(xi)后(hou)最終進(jin)(jin)入(ru)廢液桶，不能(neng)回(hui)收利(li)用(yong);另一(yi)種是(shi)(shi)分(fen)(fen)選(xuan)(xuan)型流式(shi)細(xi)(xi)胞(bao)儀，它(ta)既能(neng)進(jin)(jin)行(xing)流式(shi)分(fen)(fen)析(xi)(xi)(xi)，還能(neng)對(dui)分(fen)(fen)析(xi)(xi)(xi)的(de)目的(de)細(xi)(xi)胞(bao)進(jin)(jin)行(xing)分(fen)(fen)選(xuan)(xuan)。總體來(lai)說，市場(chang)上(shang)分(fen)(fen)析(xi)(xi)(xi)型的(de)產品多于分(fen)(fen)選(xuan)(xuan)型。

　　相關調研(yan)報(bao)告預計(ji)(ji)，2012年(nian)全(quan)球流式細胞儀的市場(chang)(chang)為30億(yi)美元，預計(ji)(ji)2020年(nian)市場(chang)(chang)規模(mo)將達到(dao)65億(yi)美元，2012到(dao)2020年(nian)間復合(he)年(nian)增長率為30.9%。而據相關網站預計(ji)(ji)，2016年(nian)我國(guo)流式細胞儀發展規模(mo)將達到(dao)7.1億(yi)元，市場(chang)(chang)主要被BD和Beckman兩(liang)家企業占領。

第八屆中國生命科學公共平臺管理與發展研討會的流式細胞儀技術論壇現場

撰稿：葉建