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微生物檢測能力驗證注意事項有哪些?

2022-06-01 作者(zhe): 瀏覽數:1055

  實(shi)驗(yan)室(shi)能(neng)(neng)力(li)驗(yan)證和(he)室(shi)間比對(dui)(dui)活動是判定實(shi)驗(yan)室(shi)檢測(ce)能(neng)(neng)力(li)的(de)重要手段之一(yi),不(bu)但可以(yi)提高實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)檢測(ce)能(neng)(neng)力(li)和(he)技術水平,發現實(shi)驗(yan)室(shi)操作技術和(he)質量管理(li)上存在的(de)問題,還能(neng)(neng)增加客戶以(yi)及相關方對(dui)(dui)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)信任。

  今天小(xiao)編和(he)大家一起來看看微生物能力驗(yan)證注意事項有哪(na)些(xie)?

  01、能(neng)力驗證(zheng)樣品接收及準備

  1、操作前仔細閱(yue)讀參考指導書,關鍵是小(xiao)的備注(zhu)要注(zhu)意,很多(duo)特殊(shu)情況(kuang)的處理大都在備注(zhu)里。

  2、樣(yang)品(pin)(pin)接(jie)收前的(de)檢(jian)查很重要(yao),首(shou)先對(dui)樣(yang)品(pin)(pin)的(de)完整性進行(xing)檢(jian)查,對(dui)信息的(de)閱讀要(yao)全面,如果發(fa)(fa)現樣(yang)品(pin)(pin)有問題及時溝通,這樣(yang)要(yao)比做樣(yang)品(pin)(pin)的(de)時候在(zai)發(fa)(fa)現來的(de)要(yao)及時,能節(jie)省不少的(de)時間;

  3、作(zuo)業(ye)指(zhi)導書的(de)(de)(de)閱(yue)讀(du)要(yao)到位,很多(duo)能力(li)驗證(zheng)樣(yang)品(pin)(pin)寄(ji)到后要(yao)跟一份作(zuo)業(ye)指(zhi)導書,作(zuo)業(ye)指(zhi)導書中往(wang)往(wang)會(hui)(hui)對(dui)本次能力(li)驗證(zheng)的(de)(de)(de)樣(yang)品(pin)(pin)、成(cheng)分、尺寸(cun)、選擇方法、樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)結果(guo)記(ji)錄、包括修(xiu)約或(huo)樣(yang)品(pin)(pin)的(de)(de)(de)粘(zhan)貼、樣(yang)品(pin)(pin)寄(ji)發的(de)(de)(de)注意事項(xiang)等有(you)明確的(de)(de)(de)規定,熟讀(du)這些(xie)對(dui)試(shi)(shi)驗準備有(you)很好(hao)的(de)(de)(de)作(zuo)用(yong)。比如(ru)有(you)的(de)(de)(de)會(hui)(hui)要(yao)求將試(shi)(shi)驗后樣(yang)品(pin)(pin)一塊(kuai)寄(ji)發組織單位,有(you)的(de)(de)(de)實驗室(shi)如(ru)果(guo)不仔細閱(yue)讀(du)的(de)(de)(de)話很容易將測(ce)試(shi)(shi)后樣(yang)品(pin)(pin)立即處(chu)理掉,如(ru)果(guo)寄(ji)樣(yang)時再(zai)看見可就完了(le)。

  4、測(ce)試(shi)(shi)(shi)前的(de)(de)(de)準備工(gong)作一(yi)定要做好(hao),包括(kuo)設備的(de)(de)(de)校準、試(shi)(shi)(shi)運行(xing)等,有條件的(de)(de)(de)情況(kuang)下可(ke)以在正式(shi)測(ce)試(shi)(shi)(shi)前選擇(ze)一(yi)塊相仿(fang)的(de)(de)(de)樣品進行(xing)一(yi)下預測(ce)試(shi)(shi)(shi),這樣會將測(ce)試(shi)(shi)(shi)過程(cheng)中的(de)(de)(de)問題提前發現(xian)提前解決。對正式(shi)測(ce)試(shi)(shi)(shi)的(de)(de)(de)操作有幫助。

  02、能力驗證樣品預處理(li)

  1、樣品(pin)(pin)測試(shi)過程(cheng)中(zhong)(zhong)的判斷能力(li)很(hen)重要,有時(shi)候我(wo)們在測試(shi)中(zhong)(zhong)往往會自以為(wei)是,為(wei)了保證測試(shi)過程(cheng)中(zhong)(zhong)的準(zhun)確操(cao)作最好是找一個經驗豐富的作督察,發(fa)現問題及(ji)時(shi)解決,如果等操(cao)作完畢再發(fa)現問題的話可能會因(yin)為(wei)樣品(pin)(pin)的消耗(hao)而無法驗證結果;

  2、定量項目,西林(lin)瓶內樣(yang)品(pin)不(bu)可分割,應全部用于檢測(ce)。一般參考書(shu)指導的是加40mL稀(xi)釋液制成(cheng)40mL樣(yang)品(pin)。

  3、定(ding)量項(xiang)目樣(yang)品稀(xi)釋(shi)(shi)。指導(dao)書標明了稀(xi)釋(shi)(shi)范圍(wei)(wei)的,在稀(xi)釋(shi)(shi)范圍(wei)(wei)左右各加1個稀(xi)釋(shi)(shi)度進行;書上沒有稀(xi)釋(shi)(shi)范圍(wei)(wei)的,多做(zuo)稀(xi)釋(shi)(shi)倍(bei)(bei)數,選擇合適的稀(xi)釋(shi)(shi)倍(bei)(bei)數計數(一般可稀(xi)釋(shi)(shi)至10-8)。

  4、定量項目(mu),除了(le)要多(duo)做稀釋倍數(shu)(shu)外(wai),同(tong)時(shi)同(tong)一(yi)稀釋度要多(duo)倒幾皿(min),從原理上(shang)來講,檢(jian)測過程屬于隨機抽樣檢(jian)查,平板越多(duo),數(shu)(shu)據(ju)越接近真值(zhi)。考(kao)慮(lv)性價(jia)比,又不可能(neng)一(yi)直瘋狂一(yi)個稀釋度很多(duo)平板,所以(yi)能(neng)力驗(yan)證時(shi)候多(duo)倒幾皿(min),求(qiu)好結(jie)果(guo)。

  5、定(ding)性項目有一些重要步驟:

  a、增(zeng)菌(jun)及(ji)分(fen)(fen)離(li)(li)步驟尤其重(zhong)要。選擇(ze)合適的增(zeng)菌(jun)液(ye)和分(fen)(fen)離(li)(li)用培養(yang)基(ji)對目標菌(jun)的檢出非常關鍵,選擇(ze)兩種以上的增(zeng)菌(jun)液(ye)和分(fen)(fen)離(li)(li)用培養(yang)基(ji)對菌(jun)株作直接分(fen)(fen)離(li)(li)和增(zeng)菌(jun)后分(fen)(fen)離(li)(li)。

  b、劃線分離十(shi)分重要,要把增菌液(ye)中的(de)目標菌盡量多(duo)的(de)表(biao)達出來(lai),要分出單個菌落(luo)并(bing)盡可能多(duo)挑(tiao)取可疑(yi)菌落(luo),確保(bao)分離到目標菌。

  c、生化試驗(yan)和血(xue)清(qing)學(xue)試驗(yan)以營養瓊脂平(ping)板上的純培養細(xi)菌為好。

  03、實(shi)驗過程一(yi)定要做陰陽對照

  陽(yang)性(xing)對照(zhao),是(shi)(shi)在(zai)(zai)試驗(yan)(yan)(yan)中,檢(jian)驗(yan)(yan)(yan)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)和培(pei)(pei)(pei)養(yang)條(tiao)件是(shi)(shi)否(fou)適合,如(ru)果在(zai)(zai)實驗(yan)(yan)(yan)中,陽(yang)性(xing)實驗(yan)(yan)(yan)沒有(you)生長(chang)的(de)話(hua),那這個實驗(yan)(yan)(yan)是(shi)(shi)失敗的(de)。陰性(xing)對照(zhao)主(zhu)要(yao)是(shi)(shi)檢(jian)測培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)是(shi)(shi)否(fou)污(wu)染(ran),在(zai)(zai)沒有(you)加(jia)入任(ren)何東西培(pei)(pei)(pei)養(yang)時,培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)培(pei)(pei)(pei)養(yang)后還是(shi)(shi)會(hui)顯示陽(yang)性(xing)結(jie)果,這就(jiu)說明培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)滅菌不徹底,染(ran)菌了(le),這樣也會(hui)影響實驗(yan)(yan)(yan)結(jie)果的(de)。

  04、培(pei)養基方面需要注意地方

  1、培養基配(pei)制充分混勻后再滅菌

  正(zheng)確做法是用一部分水(shui)攪拌均(jun)勻后,再加(jia)入(ru)剩余水(shui)量,混勻后滅菌(jun)或(huo)分裝。

  一定要用(yong)震蕩器充分混勻(yun)水化液,作為檢(jian)測原液,普通手搖混勻(yun)與經震蕩器混勻(yun)的樣品液,計(ji)數(shu)結果相差較大。混勻(yun)后(hou)的樣品嚴格按照指導(dao)書(shu)規(gui)定的時間進行檢(jian)驗(yan)。

  2、混菌法倒皿要(yao)充(chong)分混勻

  培(pei)(pei)養(yang)基(ji)倒完要(yao)左(zuo)5圈右5圈(混(hun)勻速(su)度一定(ding)要(yao)慢(man),目的是——避免(mian)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)波(bo)動到(dao)二皿接(jie)觸的縫隙(xi)部分造成后續污染(ran)),找(zhao)較水(shui)平位置(zhi)冷卻凝固。

  3、培養基要不要覆(fu)蓋(gai)問題

  覆蓋(gai)的(de)目的(de)是為了阻止活菌(jun)在培養基表層通過(guo)鞭毛移動(dong),造(zao)成片狀生(sheng)長,無法計數這(zhe)一不利現象的(de)發生(sheng)。這(zhe)里可以(yi)發揮主觀(guan)能(neng)動(dong)性-對于(yu)不運動(dong)的(de)菌(jun),可以(yi)不覆蓋(gai),對于(yu)運動(dong)的(de)菌(jun)覆蓋(gai)。

  總結一下圖片


  A、長(chang)期檢測同一種(zhong)樣(yang)品,不覆蓋并(bing)無(wu)蔓延現象(xiang),不覆蓋;長(chang)期檢測蔓延選擇了(le)覆蓋,一直覆蓋。

  B、未知樣品,進行覆蓋和不覆蓋的比對(dui)實(shi)驗,然后決(jue)定以后同樣的樣品是(shi)否需要覆蓋。養成經驗。

  C、能力(li)(li)驗證(zheng)實驗,覆(fu)蓋(gai)和不(bu)覆(fu)蓋(gai)的(de)都(dou)做(zuo),不(bu)要吝惜那么一(yi)點點培養基或耗(hao)材,畢竟能力(li)(li)驗證(zheng)實驗做(zuo)的(de)漂(piao)亮才是(shi)(shi)實驗室(是(shi)(shi)室而不(bu)是(shi)(shi)人!)能力(li)(li)的(de)綜合(he)體(ti)現。

  4、 實驗培養過程勤觀察

  微(wei)生(sheng)物培養(yang)過程一般需要(yao)(yao)幾小時(shi)到幾十小時(shi),要(yao)(yao)利用(yong)這段時(shi)間觀(guan)察培養(yang)箱(xiang)及菌生(sheng)長情(qing)況,比如溫度是否穩定,培養(yang)室內濕度如何等(deng)等(deng),多(duo)思(si)多(duo)看,準備預案。方有可能得(de)到與盲樣一致的(de)實驗(yan)結果。

  原始記錄(lu)應有條理、思路(lu)清晰,完整準確地記錄(lu)菌株鑒定檢驗(yan)的全過程,原始記錄(lu)要包含(han)檢測(ce)時間、檢測(ce)現象、檢測(ce)結果(guo)三個(ge)要素,方便檢測(ce)出現問題的溯(su)源。

  05結果(guo)判斷

  結果(guo)的判(pan)定一般(ban)根據設備(bei)操(cao)作,但是對于人為(wei)操(cao)作如評級、手工(gong)操(cao)作等(deng)結果(guo)可能會因為(wei)人員的差別而會有不(bu)同的偏差,這(zhe)樣在判(pan)定時最好是找(zhao)有經(jing)驗的部門負責人或質量專家一塊定奪,這(zhe)樣的話會減少很(hen)多不(bu)必要(yao)的錯(cuo)誤。


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